Bahan farmasi aktif peptida (API) telah mendapatkan perhatian yang signifikan dalam industri farmasi karena spesifisitasnya yang tinggi, toksisitas rendah, dan potensi untuk mengobati berbagai penyakit. Sebagai pemasok API peptida terkemuka, kami berkomitmen untuk menyediakan produk peptida berkualitas tinggi melalui metode sintesis canggih. Di blog ini, kami akan mempelajari berbagai cara API peptida disintesis.
Sintesis peptida solid - fase (SPPS)
Sintesis peptida fase padat adalah salah satu metode yang paling banyak digunakan untuk mensintesis API peptida. Pendekatan ini dipelopori oleh Robert Bruce Merrifield pada tahun 1963, yang merevolusi sintesis peptida dan membuatnya mendapatkan Hadiah Nobel dalam Kimia pada tahun 1984.
Prinsip dasar SPP melibatkan melampirkan C - terminal dari asam amino pertama dengan dukungan padat yang tidak larut, seperti resin. Resin ini menyediakan platform yang stabil untuk reaksi kimia berikutnya. Kelompok amino dari asam amino yang terpasang dilindungi dengan gugus pelindung yang cocok, biasanya FMOC (9 - fluorenylmethyloxycarbonyl) atau BOC (Tert - butyloxycarbonyl).
Setelah asam amino pertama melekat pada resin, kelompok pelindung pada kelompok aminonya dihilangkan, mengekspos kelompok amino reaktif. Asam amino berikutnya, juga dengan kelompok amino yang dilindungi, kemudian digabungkan dengan gugus amino bebas dari asam amino yang sebelumnya terpasang menggunakan reagen kopling. Reagen kopling yang umum digunakan termasuk DIC (N, N ' - diisopropylcarbodiimide), hbtu (O - benzotriazole - n, n, n', n ' - tetramethyl - uronium - hexafluoro - yo -fosfat), dan hatu (O - (7 - azabenzotrioz - nol -y), dan hatu (O - (7 - azabenzotrior -y), dan HATU (O - (7 - azabenzotrior -fosphate), dan HATU (O - (7 - azabenzotrik - azabenz), dan hatu - (7 - azabenzoz - azabenz), dan hexafluoro -y, o - (7 - azabenz), dan hexafluoro - (O - (7 - azabeno), Tetramethyluronium hexafluorophosphate).
Setelah setiap langkah kopling, kelompok amino yang tidak bereaksi dibatasi untuk mencegah pembentukan urutan penghapusan. Ini biasanya dilakukan dengan menggunakan anhidrida asetat. Siklus deproteksi, kopling, dan capping diulang untuk setiap asam amino dalam urutan peptida yang diinginkan.
Setelah seluruh urutan peptida telah dirakit pada resin, peptida dibelah dari resin menggunakan koktail belahan. Koktail ini juga menghilangkan kelompok pelindung rantai sisi mana pun yang ada pada asam amino selama sintesis. Peptida yang terpecah kemudian dimurnikan dengan metode seperti kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC).
Solusi - Sintesis peptida fase
SOLUSI - Sintesis peptida fase adalah metode yang lebih tua tetapi masih memiliki keunggulan dalam situasi tertentu. Dalam metode ini, semua reaksi terjadi dalam larutan, dan peptida tidak melekat pada dukungan yang solid.
Sintesis dimulai dengan perlindungan gugus amino dan karboksil dari asam amino individu. Mirip dengan SPP, kelompok pelindung seperti FMOC atau BOC digunakan untuk gugus amino, dan kelompok ester digunakan untuk melindungi kelompok karboksil.
Langkah pertama adalah penggabungan dua asam amino yang dilindungi untuk membentuk dipeptida. Ini dicapai dengan menggunakan reagen kopling, mirip dengan yang digunakan dalam SPP. Setelah pembentukan dipeptida, gugus pelindung di satu ujung dipeptida dihilangkan, dan kemudian digabungkan dengan asam amino atau dipeptida yang dilindungi untuk membentuk peptida yang lebih panjang.
Proses ini diulangi langkah - oleh - langkah sampai urutan peptida yang diinginkan diperoleh. Salah satu tantangan sintesis solusi - fase adalah pemurnian peptida perantara pada setiap langkah, karena campuran reaksi mengandung berbagai oleh - produk dan bahan awal yang tidak bereaksi. Pemurnian biasanya dilakukan dengan ekstraksi, kristalisasi, atau kromatografi.
Ligasi kimia
Ligasi kimia adalah metode yang kuat untuk mensintesis peptida besar atau protein yang sulit dirakit menggunakan SPPs tradisional atau sintesis fase - fase. Salah satu metode ligasi kimia yang paling baik adalah ligasi kimia asli (NCL).
Dalam NCL, peptida dengan thioester terminal C bereaksi dengan peptida lain dengan residu sistein terminal -N. Reaksi terjadi di bawah kondisi berair ringan dan menghasilkan pembentukan ikatan peptida asli antara kedua peptida.
Proses ini melibatkan sintesis pertama dua atau lebih segmen peptida menggunakan SPPS atau sintesis fase solusi. Satu segmen disiapkan dengan c -terminal thioester, dan yang lainnya dengan sistein terminal n. Segmen -segmen ini kemudian dicampur dalam buffer yang sesuai, dan reaksi ligasi terjadi. Setelah ligasi, jika perlu, residu sistein dapat dimodifikasi lebih lanjut atau digunakan sebagai pegangan untuk reaksi kimia tambahan.
Sintesis konvergen
Sintesis konvergen adalah strategi yang menggabungkan keunggulan SPP dan ligasi kimia. Alih -alih mensintesis seluruh urutan peptida secara linier, peptida dibagi menjadi segmen yang lebih kecil, yang disintesis secara terpisah menggunakan SPP.
Segmen -segmen ini kemudian diikat bersama menggunakan metode ligasi kimia. Pendekatan ini mengurangi jumlah langkah kopling yang diperlukan untuk sintesis peptida besar, yang dapat meningkatkan hasil dan kemurnian keseluruhan produk akhir. Misalnya, peptida panjang dapat dibagi menjadi tiga atau empat segmen, masing -masing mengandung 10 - 20 asam amino. Segmen -segmen ini disintesis pada resin, dibelah, dan kemudian diikat secara konvergen.
Contoh API peptida kami
Kami menawarkan berbagai macam API peptida, termasukC20 - OTB - Glu (Obbu) - ATBI10 - ATBU) Foto - O Oie - Oana - OE,C20 (OTBU) - Glu (OTBU), DanPalmitoyl - Glu (OSU) - OTBU. Peptida ini disintesis menggunakan metode canggih yang dijelaskan di atas, memastikan kemurnian dan kualitas tinggi.
Kontrol kualitas dalam sintesis API peptida
Kontrol kualitas sangat penting dalam sintesis API peptida. Kami memiliki sistem kontrol kualitas yang komprehensif untuk memastikan bahwa produk kami memenuhi standar tertinggi.
Setelah sintesis, peptida dianalisis dengan berbagai teknik, termasuk HPLC, spektrometri massa (MS), dan resonansi magnetik nuklir (NMR). HPLC digunakan untuk menentukan kemurnian peptida, sedangkan MS digunakan untuk mengkonfirmasi berat molekul peptida. NMR dapat memberikan informasi tentang struktur dan konformasi peptida.
Kami juga melakukan studi stabilitas untuk memastikan bahwa API peptida tetap stabil dalam kondisi penyimpanan yang berbeda. Ini termasuk menguji peptida pada suhu yang berbeda, nilai pH, dan di hadapan berbagai eksipien.
Kesimpulan
Sintesis API peptida adalah proses yang kompleks dan multi -langkah yang membutuhkan teknik canggih dan kontrol kualitas yang ketat. Sebagai pemasok API peptida, kami terus mengeksplorasi metode dan teknologi baru untuk meningkatkan efisiensi dan kualitas sintesis kami. Apakah itu melalui sintesis peptida fase padat, sintesis solusi - fase, ligasi kimia, atau sintesis konvergen, kami berkomitmen untuk menyediakan pelanggan kami dengan produk peptida berkualitas tinggi.
Jika Anda tertarik untuk membeli API peptida kami atau memiliki pertanyaan tentang sintesis peptida, jangan ragu untuk menghubungi kami untuk diskusi pengadaan. Kami berharap dapat bekerja sama dengan Anda untuk memenuhi kebutuhan API peptida Anda.
Referensi
- Fields, GB, & Noble, RL (1990). Sintesis peptida fase padat memanfaatkan 9 - fluorenylmethoxycarbonyl asam amino. Jurnal Internasional Penelitian Peptida dan Protein, 35 (2), 161 - 214.
- Dawson, PE, Muir, TW, Clark - Lewis, I., & Kent, SBH (1994). Sintesis protein oleh ligasi kimia asli. Sains, 266 (5186), 776 - 779.
- Chan, WC, & White, PD (2000). Sintesis peptida fase padat FMOC: pendekatan praktis. Oxford University Press.