Halo, sesama penggemar sel! Sebagai pemasok sel Tet - 213, saya memiliki pengalaman yang adil dari pengalaman yang berurusan dengan sel -sel unik ini. Di blog ini, saya akan membagikan beberapa tips tentang cara mempertahankan viabilitas sel Tet - 213.
Pertama, mari kita mengerti apa itu Tet - 213 sel. Mereka adalah jenis garis sel yang telah menunjukkan potensi besar di berbagai bidang penelitian, seperti studi ilmu saraf dan kanker. Tapi menjaga mereka tetap hidup dan menendang tidak selalu berjalan di taman.
Media kultur sel
Landasan mempertahankan garis sel adalah media kultur yang tepat. Untuk TET - 213 sel, media berkualitas tinggi adalah suatu keharusan. Saya biasanya merekomendasikan menggunakan media yang kaya akan nutrisi penting. RPMI 1640 Medium, ditambah dengan 10% janin sapi serum (FBS), penisilin, dan streptomisin, telah membuat keajaiban bagi saya. FBS memberikan faktor pertumbuhan dan hormon yang dibutuhkan sel -sel ini untuk berkembang, sedangkan antibiotik membantu mencegah kontaminasi.
Pastikan untuk menyimpan media dengan benar. Simpan di 4 ° C dan lindungi dari cahaya. Sebelum menggunakannya, hangatkan hingga 37 ° C dalam penangas air. Ini meniru suhu tubuh dan lebih nyaman untuk sel.
Kondisi inkubasi
Tet - 213 sel cukup pilih -pilih tentang lingkungan mereka. Mereka suka diinkubasi pada suhu 37 ° C di atmosfer yang dilembabkan dengan 5% CO₂. Lingkungan ini sangat mirip dengan kondisi fisiologis dalam tubuh manusia.
Investasikan dalam inkubator yang baik. Itu harus memiliki suhu dan kontrol CO₂ yang stabil. Periksa pengaturan dan kalibrasi inkubator secara teratur untuk memastikan semuanya beres. Juga, bersihkan inkubator secara teratur untuk mencegah pembangunan kontaminan.
Subkultur
Subkultur adalah langkah penting dalam mempertahankan viabilitas sel. Ketika TET - 213 sel mencapai sekitar 80 - 90% pertemuan, saatnya untuk membaginya. Pertama, lepaskan media lama dan cuci sel dengan fosfat - buffered saline (PBS) untuk menyingkirkan puing -puing. Kemudian, tambahkan solusi trypsin - EDTA untuk melepaskan sel -sel dari labu kultur. Inkubasi labu pada suhu 37 ° C selama beberapa menit sampai sel mulai membulatkan dan melepaskan.
Setelah sel terlepas, tambahkan media segar untuk menetralkan trypsin. Centrifuge suspensi sel pada kecepatan rendah untuk mem -pelet sel. Resuspend pelet dalam medium segar dan pindahkan sel ke labu kultur baru pada kepadatan penyemaian yang sesuai. Kepadatan penyemaian sekitar 5 x 10⁴ sel/cm² biasanya bekerja dengan baik untuk Tet - 213 sel.
Memantau kesehatan sel
Secara teratur memantau kesehatan Tet Anda - 213 sel sangat penting. Gunakan fase - mikroskop kontras untuk memeriksa morfologi sel. Sel TET - 213 yang sehat harus memiliki bentuk yang seragam dan melekat pada labu. Jika Anda melihat ada tanda -tanda kematian sel, seperti sel mengambang atau bentuk sel abnormal, itu bisa menjadi tanda masalah.
Anda juga dapat melakukan uji viabilitas, seperti uji eksklusi biru trypan. Campur sedikit suspensi sel Anda dengan trypan blue. Sel -sel hidup akan mengecualikan pewarna, sementara sel -sel mati akan mengambilnya dan tampak biru. Hitung jumlah sel hidup dan mati menggunakan hemositometer untuk menghitung persentase viabilitas sel.
Kualitas reagen
Menggunakan reagen berkualitas tinggi tidak dapat dinegosiasikan. Kualitas FBS, antibiotik, dan aditif lainnya dapat memiliki dampak signifikan pada viabilitas sel. Saat memilih FBS, cari batch yang telah diuji kemampuannya untuk mendukung pertumbuhan sel. Hindari menggunakan reagen atau reagen yang sudah kadaluwarsa yang telah disimpan secara tidak benar.
Beberapa faktor lain yang perlu dipertimbangkan adalah peptida yang dapat digunakan bersama dengan TET - 213 sel. Misalnya,Protein melanosit PMEL 17 (130 - 138) (manusia)telah menunjukkan potensi dalam beberapa penelitian yang terkait dengan pensinyalan sel.Urechistachinin iDanDynorphin A (1 - 17)juga peptida yang dapat dieksplorasi dalam konteks penelitian sel Tet - 213.
Pemecahan masalah
Jika Anda mengalami masalah dengan menjaga kelayakan sel Tet - 213 sel Anda, jangan panik. Berikut adalah beberapa masalah dan solusi umum:
Kontaminasi: Jika Anda melihat tanda -tanda kontaminasi bakteri atau jamur, seperti kekeruhan di media atau koloni yang terlihat, segera buang kultur yang terkontaminasi. Bersihkan inkubator dan semua peralatan secara menyeluruh. Pastikan untuk mengikuti teknik aseptik yang ketat saat menangani sel.
Pertumbuhan sel yang buruk: Jika sel tidak tumbuh dengan baik, periksa media kultur. Bisa jadi media sudah tua atau suplemen tidak berfungsi dengan baik. Juga, pastikan kondisi inkubasi benar. Terkadang, sedikit perubahan suhu atau konsentrasi CO₂ dapat mempengaruhi pertumbuhan sel.
Detasemen Sel: Jika sel -sel terlalu mudah terlepas, itu bisa karena lebih dari trypsinization. Kurangi waktu inkubasi trypsin di waktu berikutnya. Juga, pastikan solusi trypsin - EDTA segar.
Sebagai kesimpulan, mempertahankan viabilitas sel TET - 213 membutuhkan perhatian terhadap detail dan pemahaman yang baik tentang kebutuhan mereka. Dengan mengikuti tips ini, Anda dapat menjaga Tet - 213 sel Anda tetap sehat dan produktif.
Jika Anda berada di pasar untuk TET - 213 sel berkualitas tinggi, saya ingin mengobrol dengan Anda. Apakah Anda seorang peneliti yang bekerja pada proyek skala kecil atau perusahaan biotek skala besar, saya dapat memberi Anda sel yang Anda butuhkan. Jangkau untuk memulai percakapan tentang kebutuhan Anda dan bagaimana kami dapat bekerja sama.
Referensi
- Freshney, RI (2016). Kultur sel hewan: Manual teknik dasar dan aplikasi khusus. Wiley.
- Doyle, A., & Griffiths, JB (2012). Kultur sel dan jaringan: Prosedur laboratorium. Wiley - Blackwell.