Di bidang penelitian biologis, garis sel TET - 213 telah muncul sebagai model yang signifikan untuk berbagai investigasi eksperimental, terutama dalam studi yang terkait dengan ilmu saraf dan onkologi. Sebagai pemasok terkemuka sel Tet - 213, kami memahami pentingnya memilih reagen transfeksi yang sesuai untuk pengiriman gen yang efisien ke dalam sel -sel ini. Posting blog ini bertujuan untuk mengeksplorasi reagen transfeksi yang cocok untuk Tet - 213 dan memberikan wawasan tentang keunggulan dan keterbatasan mereka.
Memahami Tet - 213 sel
Tet - 213 adalah garis sel neuron manusia yang biasanya digunakan dalam penelitian karena kemampuannya untuk berdiferensiasi menjadi sel neuron - seperti. Sel -sel ini berasal dari tumor neuroblastoma dan mempertahankan banyak karakteristik sel progenitor neuron. Sifat unik mereka membuat mereka berharga untuk mempelajari perkembangan neuron, fungsi, dan patogenesis penyakit neurologis. Mentransfeksi gen eksogen ke TET - 213 sel dapat membantu para peneliti memahami fungsi gen, mekanisme pengaturan, dan efek protein spesifik pada proses seluler.
Pertimbangan Utama untuk Transfeksi di TET - 213 Sel
Sebelum memilih reagen transfeksi, beberapa faktor perlu dipertimbangkan. Pertama, efisiensi transfeksi sangat penting. Transfeksi efisiensi tinggi memastikan bahwa sebagian besar sel mengambil DNA atau RNA eksogen, memungkinkan untuk ekspresi kuat gen target. Kedua, viabilitas sel harus dipertahankan setelah transfeksi. Beberapa reagen transfeksi dapat menjadi racun bagi sel, yang menyebabkan kematian sel atau perilaku seluler abnormal. Ketiga, jenis asam nukleat yang ditransfeksi (DNA, RNA, atau oligonukleotida) dan ukurannya juga dapat mempengaruhi pilihan reagen transfeksi.
Reagen transfeksi yang cocok untuk TET - 213 sel
Reagen Transfeksi Berbasis Lipid
Reagen transfeksi berbasis lipid adalah salah satu jenis agen transfeksi yang paling umum digunakan. Mereka bekerja dengan membentuk liposom yang merangkum asam nukleat dan menyatu dengan membran sel, memungkinkan asam nukleat memasuki sel. Lipofectamine 2000 adalah reagen transfeksi berbasis lipid yang diketahui yang telah banyak digunakan untuk mentransfeksi sel Tet - 213. Ini menawarkan efisiensi transfeksi yang tinggi, toksisitas yang relatif rendah, dan cocok untuk mentransfeksi DNA dan RNA.
Mekanisme Lipofectamine 2000 melibatkan pembentukan liposom bermuatan positif yang berinteraksi dengan asam nukleat bermuatan negatif untuk membentuk lipoplexes. Lipoplexes ini kemudian diinternalisasi oleh sel melalui endositosis. Begitu berada di dalam sel, asam nukleat dilepaskan dan dapat diangkut ke nukleus untuk ekspresi gen.
Reagen berbasis lipid lain, Lipofectamine 3000, juga menunjukkan kinerja yang baik dalam mentransfeksi TET - 213 sel. Ini adalah versi Lipofectamine 2000 yang lebih baik, dengan peningkatan efisiensi transfeksi dan berkurangnya toksisitas. Lipofectamine 3000 menggunakan formulasi baru yang memungkinkan interaksi yang lebih baik dengan membran sel dan pengiriman asam nukleat yang lebih efisien.
Reagen transfeksi berbasis polimer
Reagen transfeksi berbasis polimer adalah pilihan lain untuk mentransfeksi sel TET - 213. Polyethylenimine (PEI) adalah reagen berbasis polimer yang umum digunakan. PEI adalah polimer kationik yang dapat memadatkan asam nukleat menjadi partikel kecil dan meningkatkan penyerapannya oleh sel. Telah dilaporkan untuk mencapai efisiensi transfeksi yang tinggi dalam sel TET - 213, terutama untuk transfeksi DNA. Keuntungan PEI adalah biaya rendah dan kemudahan penggunaan. Namun, dapat menjadi racun bagi sel pada konsentrasi tinggi, sehingga diperlukan optimalisasi kondisi transfeksi yang cermat.
Jetpei adalah reagen transfeksi berbasis polimer komersial yang telah dirancang untuk meminimalkan toksisitas sambil mempertahankan efisiensi transfeksi yang tinggi. Ini telah berhasil digunakan dalam mentransfeksi sel Tet - 213, memberikan keseimbangan yang baik antara efisiensi transfeksi dan viabilitas sel.
Vektor transfeksi berbasis viral
Vektor berbasis viral juga banyak digunakan untuk pengiriman gen ke sel Tet - 213. Vektor adenovirus dikenal karena efisiensi transfeksi yang tinggi dan kemampuan untuk menginfeksi sel yang membelah dan tidak membelah. Mereka dapat membawa DNA eksogen dalam jumlah besar dan memberikan ekspresi gen yang kuat dan berkelanjutan. Namun, produksi vektor adenovirus lebih kompleks dan mengkonsumsi waktu dibandingkan dengan reagen transfeksi non -virus.
Vektor lentivirus adalah pilihan lain. Mereka dapat mengintegrasikan DNA eksogen ke dalam genom sel inang, menghasilkan ekspresi gen yang stabil. Vektor lentivirus cocok untuk studi jangka panjang dalam sel TET - 213, seperti menghasilkan garis sel yang stabil. Namun, mereka juga membutuhkan penanganan khusus karena potensi risiko biohazard mereka.
Membandingkan reagen transfeksi untuk TET - 213 sel
Saat membandingkan reagen transfeksi yang berbeda, penting untuk mempertimbangkan kinerjanya dalam hal efisiensi transfeksi, viabilitas sel, kemudahan penggunaan, dan biaya. Reagen berbasis lipid seperti Lipofectamine 2000 dan 3000 relatif mudah digunakan dan memiliki efisiensi transfeksi yang tinggi dengan viabilitas sel yang dapat diterima. Mereka cocok untuk eksperimen jangka pendek dan jangka panjang. Reagen berbasis polimer seperti PEI dan Jetpei adalah biaya - efektif dan dapat mencapai efisiensi transfeksi yang baik, tetapi optimasi toksisitas diperlukan. Vektor berbasis viral menawarkan pengiriman gen efisiensi tinggi dan ekspresi stabil tetapi membutuhkan lebih banyak peralatan khusus dan tindakan pencegahan keamanan.
Aplikasi Sel TET - 213 yang ditransfeksi
Setelah berhasil ditransfeksi, TET - 213 sel dapat digunakan dalam berbagai aplikasi. Sebagai contoh, dalam studi fungsi gen, sel yang ditransfeksi dapat digunakan untuk menyelidiki peran gen spesifik dalam perkembangan dan fungsi neuron. Dengan mengekspres atau merobohkan gen tertentu, para peneliti dapat mengamati perubahan morfologi seluler, pelepasan neurotransmitter, dan jalur transduksi sinyal.
Dalam penemuan obat, sel TET - 213 yang ditransfeksi dapat digunakan sebagai model skrining untuk mengidentifikasi agen terapi potensial. Misalnya, gen yang terkait dengan penyakit neurologis dapat ditransfeksi ke dalam sel, dan kemudian sel dapat diobati dengan senyawa yang berbeda untuk mengevaluasi efeknya pada fenotip terkait penyakit.
Selain itu, TET - 213 sel ditransfeksi dengan gen yang mengkode protein fluorescent dapat digunakan untuk studi pencitraan sel hidup. Ini memungkinkan para peneliti untuk mengamati proses seluler yang dinamis secara nyata.
Peptida terkait untuk percobaan terkait
Dalam beberapa percobaan yang melibatkan sel TET - 213 yang ditransfeksi, peptida tambahan dapat digunakan. Misalnya,Siklo (radfk),Substansi P (9 - 11), DanBeta - amiloid (1 - 40), manusiaDapat digunakan dalam studi yang terkait dengan pensinyalan neuron, interaksi peptida - reseptor, dan penyakit neurodegeneratif. Peptida ini dapat membantu menjelaskan lebih lanjut mekanisme yang mendasari fungsi neuron dan perkembangan penyakit.
Kesimpulan
Memilih reagen transfeksi yang sesuai untuk TET - 213 sel sangat penting untuk pengiriman gen yang berhasil dan studi eksperimental berikutnya. Reagen transfeksi berbasis lipid, polimer - berbasis, dan virus masing -masing memiliki keunggulan dan keterbatasan mereka sendiri. Para peneliti harus hati -hati mempertimbangkan persyaratan spesifik dari percobaan mereka, seperti efisiensi transfeksi, viabilitas sel, dan jenis asam nukleat yang ditransfeksi, ketika memilih reagen transfeksi.
Sebagai pemasok sel Tet - 213, kami berkomitmen untuk menyediakan sel berkualitas tinggi dan menawarkan panduan tentang praktik terbaik untuk kultur sel dan transfeksi. Jika Anda tertarik untuk membeli TET - 213 sel untuk penelitian Anda atau memiliki pertanyaan tentang reagen transfeksi dan eksperimen terkait, jangan ragu untuk menghubungi kami untuk informasi lebih lanjut dan untuk membahas peluang kolaborasi potensial.
Referensi
- Sambrook, J., & Russell, DW (2001). Kloning Molekuler: Manual Laboratorium. Pers Laboratorium Cold Spring Harbor.
- Chen, C., & Okayama, H. (1987). Transformasi efisiensi tinggi sel mamalia oleh DNA plasmid. Biologi molekuler dan seluler, 7 (8), 2745 - 2752.
- Amara, F., Rehem, A., & Galy, A. (2016). Tinjauan metode transfeksi saat ini dan sistem pengiriman. Jurnal Farmasi & Ilmu Bioallied, 8 (3), 181 - 187.